在等密度梯度离心方法中，样品是被置于一个较陡峭的密度梯度中沉降。该梯度的密度大于样品混合物颗粒的密度，最小密度低于混合物颗物的最小密度。当其中特种样品颗粘沿梯度运动达到省各自颗粒浮力密度相同的密度处时就停止移动，形成按俘力密度不向而分布的样品区带。由于这种离心是将样品颗粒沉降到梯度介质中与其浮力密度相等的密度梯度区，故称为等密度离心。
    等密度梯度离心又分为口成形平衡等密度梯度离心将领成形等密度梯度离心。
    (1)平衡等密度梯度离心
    在这种离心方法中，依据术同个物大分子在浮力密度上的差异选用梯度介质材料。当受到离心力的作用时，能够自成形—定斜率的密度梯度，而撤去离心力后这一梯度仍能稳定存在很长一段时间。这些梯度介质材料本身不要对样品颗粒有不利影响。
在这种能自形成梯度的离心场内加入被分离的样品，经过足够时间离心后，需分离颗粒可分别到达并停留在与其自身相等浮力密度的平衡位置而达到分离目的。各种梯度的密度一般为离心管底密度大于样品颗粒，而表面则小于它。这样使得样品颗粒分布在一个相对很窄的范围内。
这种方法的特点是分离纯度好，区带稳定，操作方法十分简单方便，只需把梯度介质溶液与样品混合后加入离心管离心即可，不需要制备梯度而大大简化操作，但介质材料一般都较贵。对介质材料的选择、离心条件的计算、材料与样品的性质都需要有详细的了解，而且形成平衡的离心时间一般都较长。梯度介质的材料常使用碱金属盐类如CsCl、CsS04及Percoll等。
    (2)预成形等密度梯度离心
    预成形等密度梯度离心又分连续等密度梯度与不连续密度梯度即阶梯密度梯度。

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